本发明涉及硫酸阿托品技术领域，具体涉及一种硫酸阿托品原料药杂质的HPLC检测方法，所述方法包括下述步骤：S1、配制供试品溶液、对照溶液、流动相；所述流动相包括流动相A和流动相B；所述流动相A为磷酸盐缓冲液‑乙腈，所述流动相B为磷酸盐缓冲液‑乙腈；S2、色谱条件准备；S3、HPLC系统适用性试验测定；S4、硫酸阿托品原料药杂质测定及色谱图分析。本发明具有快速简便、灵敏度高、准确可靠的优点。