本发明涉及一种从柞蚕丝脱胶工业废水中制备丝胶蛋白的方法。本发明以柞蚕丝工业废水为原料，利用Folin‑酚比色法对溶液中蛋白质总含量进行检测，并观察柞蚕丝废水的颜色与有无沉淀，测量其pH。利用盐析法粗体溶液中的丝胶蛋白，并且进行透析操作去除蛋白溶液中大量的盐离子。有机沉淀法进一步提取溶液中的丝胶蛋白，提高溶液中蛋白质纯度，以达到从柞蚕丝生产废水制备丝胶蛋白的目的。本发明不仅防止环境污染，解决了污水处理的问题，同时可将提取的丝胶蛋白应用于化妆品、食品、纤维与纺织业、医药和生物材料等领域，在现代新工业的研究中具有重大的意义。