本发明涉及一种注射用美洛西林钠舒巴坦钠中有关物质的检测方法，属于化学药物分析方法技术领域。本发明采用梯度洗脱过程可以分离舒巴坦和美洛西林的杂质，同时可以对两种成分的杂质进行归属，有效区分美洛西林和舒巴坦的杂质，专属性高，灵敏度高，回收率高，检测出的杂质多，能快速、有效、准确监控注射用美洛西林钠舒巴坦钠中的有关物质。