本发明属于生物医药技术领域，特别针对一种聚合物负载天然右旋龙脑纳米粒子及其制备方法和应用。本发明提供的制备方法包括以下步骤：当高分子聚合物为脂溶性时，将其和天然右旋龙脑溶于有机溶剂中，作为有机相，将乳化剂溶于水中作为水相；当高分子聚合物为水溶性时，将其和乳化剂溶于水中作为水相，将天然右旋龙脑溶于有机溶剂作为有机相；然后将有机相滴加到水相中搅拌，得到反应液；将反应液纯化，干燥，得到聚合物负载天然右旋龙脑纳米粒子。本发明合成的聚合物负载有天然右旋龙脑纳米粒子，提高了天然右旋龙脑的水溶性和稳定性，还提高其在肿瘤细胞的吸收和抗肿瘤活性，以及细胞对抗肿瘤药物的吸收，从而增敏药物的抗肿瘤活性。