本发明属医药和生物工程学领域，涉及人α干扰素亚型在制备抗乙肝病毒药物中的应用，本发明针对现有技术中用于治疗慢性乙型肝炎的人基因组编码干扰素亚型IFN‑α2应答率较低而副作用较大的问题，经体外病毒转染及感染模型鉴定提供了包括IFN‑α14，IFN‑α6和IFN‑α1的多种α干扰素亚型，经试验显示，所述的多种α干扰素亚型相较IFN‑α2具有更强的抗乙肝病毒活性，且在抗病毒浓度下无细胞毒效应，其中IFN‑α14具有最强的抗HBV活性。本发明所述的多种α干扰素亚型可用于制备新的抗乙肝病毒效应显著好的抗乙肝病毒药物。