本发明公开了一种沉默小鼠肠道RASGRP1表达的腺相关病毒及其制备方法和应用。本发明针对RASGRP1基因设计了三对siRNA序列，并构建了RasGRP1 shRNA干扰载体，qPCR筛靶结果显示，PAAVE2113, PAAVE2114和PAAVE2115均有沉默效果，其中PAAVE2115沉默效果最好，沉默效率约为74％，与WB结果一致。将所述的干扰载体和辅助质粒共转染工程细胞，获得沉默小鼠肠道RASGRP1表达的腺相关病毒，动物实验证实，采用该腺相关病毒干扰C57小鼠，可使小鼠小肠组织中RasGRP1蛋白表达下降，且采用腹腔注射的方式，干扰效果最好。