本发明属于蛋白质工程和医药生产领域，提供一种2‑甲基丁酸侧链水解酶，所述酶通过定点突变野生型PcEST得到，突变位点是第140位。本发明还提供与所述酶相关的生物材料，所述酶的应用，以及编码所述酶的曲霉菌株和构建方法。本发明提供的2‑甲基丁酸侧链水解酶酶活性高，对温度的稳定性提高，更有利于工业化应用。