本发明属于生物医药技术领域，特别涉及一种天然右旋龙脑纳米粒子及其制备方法与应用。本发明通过将天然右旋龙脑和有机溶剂混合搅拌，使天然右旋龙脑完全溶解；然后加入表面活性剂、油脂和水，搅拌均匀后得到水包油型乳液；均质，得到天然右旋龙脑纳米粒。本发明提供的天然右旋龙脑纳米粒子的粒径小，粒度分散均匀，稳定性高，相比于单独天然右旋龙脑，天然右旋龙脑纳米粒子具有明显的抗肿瘤活性，且具有良好的靶向性，与抗肿瘤药物具有协同增效作用，实现明显高效的抗肿瘤效果。