本发明公开了一种原代肿瘤细胞的培养组合物及其应用，由以下组份组成：在含10％胎牛血清的中RPMI 1640培养中，按重量百分数计，加入以下组份的混合物：脂联素5％～15％、TGF‑β1 30％～50％、IGF‑1 10％～30％、LIF20％～40％。使用本发明的培养基，可使从癌症患者体内提取、分离得到的原代肿瘤细胞生长增殖速度提高，明显降低肿瘤细胞培养时间。