本发明属于生物医药领域，涉及一种诊断2型糖尿病的miRNA分子标志物及其应用。步骤如下：血液总RNA的抽提及cDNA的制备；荧光定量PCR检测hsa‑miR‑149‑3p水平；miRNA分子标志物的评估。本发明通过大样本检测，发现新的外周血miRNA标志物hsa‑miR‑149‑3p在2型糖尿病患者中明显升高，且其分子水平与受检者血糖水平呈显著正相关。该检测方法操作简便，对受检者的创伤性小，且灵敏度高，特异性强，可用于早期和不同阶段2型糖尿病的诊断。在此基础上，本发明开发了检测血液hsa‑miR‑149‑3p的引物、试剂盒和检测方法，具有明显的临床应用价值。