本发明公开了一种具有抗肿瘤活性的O‑对硝基苯甲酰基土甘草A，其结构式为：本发明还提供上述O‑对硝基苯甲酰基土甘草A的制备方法：以土甘草A为原料，吡啶为缚酸剂，乙腈为溶剂回流反应，冷却后蒸除溶剂，无水乙醇中重结晶得到纯品。本发明提供的O‑对硝基苯甲酰基土甘草A经体外抗肿瘤实验表明具有强的抗肿瘤活性。