本发明涉及一种从泡桐花中分离糖苷类化合物的方法及应用，包括以下步骤，1.制备组分Fr.C‑1~Fr.C‑5，2.制备化合物Paulowninoside B，3.制备化合物Paulowninoside C和化合物Paulowninoside D，可有效用于保护过氧化氢诱导的NRK52e细胞损伤药物中的应用。