本发明公开了一种用于进展期腺瘤、结直肠癌相关基因多位点甲基化检测的粪便检测试剂盒，它包括如下的引物和探针：SEQ ID NO：1‑SEQ ID NO：131，还包括用于大量提取和转化粪便DNA的组合物。本发明的试剂盒，可以使用无创粪便检测肠癌甲基化相关基因，以多基因联合检测等方式进行大肠进展期腺瘤、结直肠癌患者的早期筛查。本发明试剂盒的多组合联合检测结果精确，单组合单管检测、单组合重复管检测、多组合联合甲基化检测进展期腺瘤敏感度62‑90％，结直肠癌敏感度78‑100％，特异性82‑100％，并且总体检测成本相较于乙状结肠镜检查费用低，可用于临床传统检查之前进行结直肠癌早期筛查等多用途，避免部分受检人员遭受乙状结肠镜等痛苦的检测手段。