本发明涉及一种酶活提高的青霉素酶突变体及其构建方法，属于基因工程技术领域。本发明酶活提高的青霉素酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO : 1所示。本发明采用单点突变技术，基于同源建模方法，通过选择特定氨基酸优化青霉素酶分子结构、提高酶活，对于满足青霉素酶工业化成产需求和降低生产成本有重要意义。