本发明涉及一种pH稳定性提高的转氨酶突变体，属于蛋白质工程技术领域。通过对转氨酶晶体结构的分析，对活性口袋上方loop区域的高柔性残基(R131，P132，E133)进行饱和突变进化，在高通量的筛选下，获得三个突变体(R131A，R131C和R131D)，所对应的突变体氨基酸序列依次为SEQ NO.2，SEQ NO.3和SEQ NO.4。本发明所述的pH稳定性提高的转氨酶突变体能够在pH 9.5的条件下，保持高催化活性，进一步提高转氨酶在手性胺类医药中间体的工业化应用潜力。