本发明涉及一种诱导性多能干细胞诱导成成纤维细胞的培养基及其制备方法。该培养基包括基础培养液和添加物，所述基础培养液为体积比为1 : 0.5～2的H‑DMEM培养液和F12培养液；以在所述基础培养液中的浓度计，所述添加物包括如下组分：非必须氨基酸、谷氨酰胺衍生物、胰岛素、氢化可的松、转铁蛋白、亚硒酸钠、成纤维细胞生长因子、雌二醇、黄体酮、8‑溴环磷腺苷、人卵泡刺激素。该培养基能够获得较现有技术更高的成纤维细胞分化概率，并且能够稳定传代，提高细胞的增殖速度，为皮肤组织工程提供成纤维细胞的种子细胞来源，同时整个过程没有用到血清，有效的避免了动物源性病原体带来的风险，提高了临床应用的安全性。