本发明公开了一种去乙酰头孢噻肟的制备方法，该方法以D‑7‑ACA和AE‑活性酯为反应原料，通过对原料配比、反应温度、体系酸碱度进行匹配控制，制得去乙酰头孢噻肟成品。本发明提供了一种通过化学合成的手段来制备去乙酰头孢噻肟的工艺方法，能够高收率、高纯度、便捷的获取去乙酰头孢噻肟标准品，进而提高头孢噻肟钠的生产品质。