本发明公开了一种千里香愈伤组织的诱导方法。所述诱导方法包括以下步骤：S1.材料的预处理：将千里香成熟种子先用75%乙醇溶液消毒1～2 min，再用含有吐温20的升汞消毒6～12 min，将消毒后的种子去除种皮，接种到MS基本培养基中培养成无菌苗；S2.愈伤组织诱导：将无菌苗的叶片或根段作为外植体接种于诱导培养基上培养至长出愈伤组织。本发明以无菌苗的叶片或根段作为外植体，分别研究了适合于叶片或根段愈伤组织的诱导培养基，能在提高千里香愈伤组织诱导率的同时降低其褐化率，且不影响愈伤组织后续增殖继代培养，可应用于千里香种苗繁育、多倍体诱导、突变诱导以及转基因种质创新。