本发明公开了本发明提供一种大肠杆菌的快速检测方法，包括以下步骤：1.培养基配制；2.无菌操作取25g(mL)样品到均质袋中，并向其中加入225mL预热后的增菌培养基，放入均质器中均质2min; 42℃静止或者振荡培养6h, 根据需要也可以延长至24h；取0.1mL上述增菌液，加入含1mL选择性培养基的5mL玻璃管内，42±1℃继续培养18‑24 h; 3.将样品垫、结合垫(含金标抗体，干燥)、硝酸纤维素膜, 吸水垫依次贴在带有黏合剂的PVC背板上，切成4mm宽的试纸，室温干燥备用。4.将培养物混合均匀，取1mL到试管中沸水(100℃)加热10min，冷却至室温，用滴管滴加3‑4滴至胶体金试纸的样品孔，反应5‑10min，判读结果，超过30min显色无效。本发明为面向医药废水中粪大肠菌群快速检测提供了一种便捷有效地途径。