本发明公开了一种羟基红花黄色素A代谢物产物的检测方法：(1)取谷红注射液静脉注射SD大鼠，眼眶采血，血样离心分离血浆；(2)微量加样器吸取血浆，加入乙腈，血浆与乙腈的体积比为1：3～3.5；涡旋混匀后离心，取上清液氮气吹干，再用乙腈溶解，离心，取上清作为样品待测；(3)采用高效液相色谱‑三重四极杆线性离子阱串联质谱对样品进行检测分析，采用p‑MRM‑IDA‑EPI模式来分析代谢产物。本发明通过质谱采用p‑MRM方法结合软件快速鉴定分析，对血浆中各个成分变化及结构改变等代谢变化跟踪，结果发现羟基红花黄色素A代谢产物11个，完成了羟基红花黄色素A及代谢产物在血浆中的时间变化曲线，并成功推断鉴定了其中羟基红花黄色素A的7个代谢产物及同分异构体的分子结构，比目前采用化学结构分析手段更快速、更灵敏。