本发明涉及医药注剂技术领域，公开了一种肌苷注射液及其制备方法，其中，每100mL注射液中，包含：肌苷0.58‑0.62g、氯化钠0.85‑0.95g、苷氨酸0.08‑0.12g和苯甲酸钠0.05‑0.5g。制备所述注射液的方法包括：向氢氧化钠水溶液中加入肌苷，得到肌苷水溶液；将肌苷水溶液与氯化钠、苷氨酸和苯甲酸钠混合；加入活性炭，搅拌后过滤，加注射用水进行稀释；调节溶液的pH至7‑8。本发明通过在肌苷注射液中同时加入较小量的苷氨酸和苯甲酸钠作为助剂，避免了注射液色泽变黄的现象，使得该注射液性能更加稳定；另外，本发明还最大限度地避免了助剂对注射液活性成分造成的不良影响。