本发明公开了一种左磷霉素右苯乙胺盐及其对映异构体的检测方法，涉及药物分析领域。通过高效液相色谱仪分析左磷霉素右苯乙胺盐及其对映异构体，采用阴离子交换手性柱及特定的成份和比例的流动相进行样品的分析。该方法能简单、快速、准确地分析分离左磷霉素右苯乙胺盐及其对映异构体，该方法具有再现性好，分离度高，检测样品稳定等优势。