本发明公开了一种增强乳酸菌胆汁耐受能力的方法，采用重组DNA技术将唾液乳酸杆菌Lactobacillus salivarius LMG14476的胆盐水解酶基因克隆连接到乳酸乳球菌表达载体pNZ8148，并转化至Lactococcus lactis NZ9000，经筛选鉴定得到具有胆盐水解酶活性的重组乳酸乳球菌。该菌株胆汁耐受能力比野生菌提高了近5倍。采用本发明方法构建出的具有胆盐水解酶活性的乳酸乳球菌可作为具有降低血清胆固醇功能的益生菌制剂的模式菌株，应用于医药、食品领域。