本发明提供了一种制备郁李仁多肽的方法，包括：1)从郁李仁中分离蛋白质，获取郁李仁分离蛋白；2)对步骤1)获取的郁李仁分离蛋白进行酶解，得到郁李仁蛋白酶解液；3)将步骤2)得到的郁李仁蛋白酶解液进行体外模拟胃肠道消化。4)将步骤3)体外模拟胃肠道消化的产物用超滤膜分离得到不同分子量段多肽。本发明还提供了上述郁李仁多肽及应用。本发明将郁李仁蛋白酶解液进行体外模拟胃肠道消化，并通过超滤膜对体外模拟胃肠道消化得到不同分子量段多肽，获得了对α‑葡萄糖苷酶、α‑淀粉酶及DPP‑IV的活性具有较好的抑制作用的郁李仁多肽。