本发明属于生物医药领域，具体涉及一种提高人类干细胞来源肝样细胞解毒功能的方法及其应用。其特征是通过在干细胞肝向分化过程中转染miR‑142‑3p抑制剂，所述miR‑142‑3p抑制剂的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。经过干细胞的分化，转染miR‑142‑3p抑制剂，转染后分化和肝样细胞的分子和功能检测后发现在干细胞肝向分化的第8天转染10nM的miR‑142‑3p抑制剂，所述的CYP2E1和CYP3A4的酶活力最高。所述方法克服了人类干细胞来源肝样细胞解毒能力不高的劣势，有利于人工肝的开发及利用人类干细胞来源肝样细胞或人工肝进行医药研发的深入研究。