本发明涉及一种生产多拉菌素的发酵培养基及多拉菌素的生产方法。所述发酵培养基组成包括：淀粉100‑140g/L、淀粉酶0.1‑0.2g/L、黄豆饼粉12‑18g/L、棉籽饼粉12‑18g/L、酵母粉0.5‑1.5g/L、2, 2‑甲基丁酸0.01‑0.2g/L、环己甲酸或者环己甲酸钠0.2‑0.4g/L。本发明通过对发酵培养基及多拉菌素生产方法的改进，显著提高多拉菌素的发酵水平，在发酵370h，效价达到3545μg/ml，且整个生产工艺简单易操作，有利于工业化生产。