一种检测N‑乙酰转移酶2荧光探针的应用，其属于生物医药技术领域。它可用于测定不同来源生物体系中N‑乙酰转移酶2的酶活性。以ARHB作为特异性探针反应底物，借助N‑乙酰转移酶2体外反应体系，通过定量检测单位时间内N‑乙酰化代谢产物的生成量来测定各生物样品中N‑乙酰转移酶2的活性。本发明可用于不同个体来源人和动物组织样本、不同种属细胞及细胞制备物、以及各种植物和微生物中N‑乙酰转移酶2活性的定性、定量测定，并可实现对N‑乙酰转移酶2处置药物能力的评估，以及N‑乙酰转移酶2抑制剂的开发、筛选。