本发明属于生物医药领域，尤其涉及一种检测HPV18 E7蛋白的单克隆抗体及其制备和应用。本发明最终得到特异性高、亲和力强、能够稳定表达且重复性良好的单克隆抗体，能特异性的识别HPV18 E7蛋白，具有用于制备防治宫颈癌、阴茎癌、会阴部癌、阴道癌、肛门癌及口咽部癌等癌症的药物的潜力。