本发明提供一种脐带间充质干细胞因子冻干粉及其制备方法，其采用机械刺激和低氧刺激的条件培养脐带间充质干细胞，促进干细胞因子分泌，同时采用脱脂乳粉、海藻糖、羧甲基纤维素、羟乙基淀粉、谷氨酰胺和泊洛沙姆各组分的合理配合作为冻干粉保护剂，制备得到的期待间充质干细胞因子冻干粉具有良好的稳定性、干细胞因子含量及活性。