本发明属于分子生物学与生物医学技术领域，具体的说，本发明涉及基于CRISPR/Cas9系统的gRNA序列在引起肿瘤细胞凋亡中的应用。本发明根据CRISPR/Cas9的设计原则，在人基因组上设计了两个靶位点，合成相应的oligos，并且将其构建在px458载体上。在人肝癌细胞株(HepG2)中利用针对这两个靶点设计构建gRNA指导的CRISPR/Cas9系统，可以有效的敲除人TCAB1基因，这一系统易于操作，人TCAB1基因敲除效率高。本发明涉及的gRNA指导CRISPR/Cas9系统有望在治疗肿瘤的新型药物中得到应用。