本发明涉及生物转化技术领域，公开了一种生物转化合成天麻素的方法及应用，其中所述方法为，向含益母草悬浮细胞的培养液中添加对羟基苯甲醇，经过一定的转化时间，使所述益母草悬浮细胞中含有天麻素，使其所述培养液中也含有天麻素。本发明将对羟基苯甲醇直接添加到含益母草悬浮细胞的培养液中，将对羟基苯甲醇转化合成为天麻素，大大减少了对羟基苯甲醇的损耗，转化率高，且益母草悬浮细胞培养所需时间较短，易于获得，操作非常简便、安全。