本发明公开了一种长效缓释细胞支架，包括药物‑细胞因子蛋白、丝素蛋白和复合蛋白，所述药物‑细胞因子蛋白经所述丝素蛋白混合包被形成的细胞因子缓释微球，所述复合蛋白包被在所述细胞因子缓释微球的外层，所述丝素蛋白为通过钙盐调控自组装的丝素蛋白，所述复合蛋白包括可逃逸机体免疫攻击、可被细胞降解代谢的明胶；及其制备方法、应用，本发明先通过丝素蛋白包被形成细胞因子缓释微球，再包被可被细胞降解利用的复合蛋白，可现实药物的3‑5个月的长期缓释；采用的复合蛋白形成水凝胶的杂合体比单纯的胶原蛋白和硫酸软骨素的机械耐受性强；且同源性好、药物缓释期长、在被转化为软骨基质过程中软骨组织的机械耐受性和代谢活力更好。