本发明属于医学生物材料技术领域，具体涉及一种以动物跟腱为原材料制作Ⅰ型胶原海绵的方法，其主要特征在于制备的胶原海绵是以三螺旋结构的形式存在。利用酸膨胀—胃蛋白酶降解的新方法提取低免疫原性的胶原蛋白，再利用盐析及透析等纯化方法得到高蛋白含量、高纯度的Ⅰ型胶原蛋白。最后利用交联、冻干成型、数次清洗、二次冻干及辐照灭菌等过程得到具有一定机械强度、有一定的透湿性、具有适宜的孔径与孔隙率以及无菌的三维结构的医用胶原蛋白海绵。本发明获得的高纯度Ⅰ型胶原蛋白海绵，可广泛应用于医药领域(如组织修复)。