本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种D‑乳酸脱氢酶和和甘油脱氢酶融合蛋白，同时涉及含有该融合蛋白的工程菌全细胞催化生成D‑苯乳酸的方法。本发明利用基因融合策略，首次将D‑乳酸脱氢酶(D‑LDH)和甘油脱氢酶(GlDH)进行融合表达并引入到D‑苯乳酸合成代谢途径中，在以苯丙酮酸为底物不对称合成D‑苯乳酸(D‑PLA)的反应中，实现辅酶因子的再生和高产量的D‑苯乳酸的生产。成本低廉，安全性高，并且甘油转化为二羟基丙酮，可以作为重要的医药、化学合成中间体，广泛应用于精细化工、食品工业和化妆品工业，附加值高。