本发明提供了一种偶联抗体的聚苯乙烯微球的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：(1)将羧基聚苯乙烯微球置于缓冲液中，调节羧基聚苯乙烯微球浓度；(2)将抗体加入到步骤(1)缓冲液中，添加偶联剂进行偶联反应；(3)将步骤(2)反应后的溶液混匀，加入封闭试剂；(4)向步骤(3)封闭后的溶液中加入表面活性剂，混匀得到所述偶联抗体的聚苯乙烯微球；本发明提供的制备方法省去了离心和超滤过程，降低了工艺难度，同时降低了生产成本，对于实际应用生产具有较高的价值。