本发明涉及医药领域，具体涉及一种激活HIV潜伏病毒的组合物及其应用。该组合物由单克隆抗体药物、组蛋白去乙酰化酶抑制剂和PKC激活剂组成，其中单克隆抗体药物选自抗人CD3单克隆抗体和抗人CD28单克隆抗体，组蛋白去乙酰化酶抑制剂选自伏立诺他和丙戊酸中的至少一种，PKC激活剂为12‑脱氧佛波醇‑13‑乙酸(Prostratin)。HIV难以治愈的主要障碍是HIV在感染极早期就在机体内建立起隐秘的病毒“储藏库”，本发明的组合物具有显著激活潜伏的HIV感染的CD4+T细胞的作用，能同时从细胞水平、染色质水平和HIV病毒特异性的转录因子水平激活HIV潜伏病毒，能够充分激活静息CD4+T细胞中的HIV前病毒，且不会产生明显的细胞毒副作用，是迈向HIV功能性治愈的必要途径。