本发明公开了一种提高鸡腿菇菌丝体中不饱和脂肪酸含量的方法，具体步骤如下：步骤一，菌种活化；步骤二，制备液体种子液；步骤三，培养液体种子；步骤四，制备深层发酵培养基；步骤五，液体发酵培养。本发明主要是在鸡腿菇液体发酵过程中，在培养基中添加特定的植物油和葡萄糖作为发酵所需的双碳源，使鸡腿菇菌丝体中亚油酸的含量提高3％‑5％，使鸡腿菇营养更加充分，具有广阔的使用前景。