本发明涉及一种利用外周血体外制备成熟红细胞的方法及制剂，特别涉及一种利用外周血中的Lin‑CD34‑细胞制备成熟红细胞的方法，包括富集Lin‑CD34‑细胞，往红系细胞分化Lin‑CD34‑细胞以及促进红细胞脱核成熟的步骤；另外还涉及利用所述方法制备得到的成熟红细胞以及其中应用的分化培养基以及细胞因子组合，该制备方法具有以下优点：原材料易得，红细胞得率高，得到的红细胞性能良好。