本发明公开了抗Eno1抗体及其用途，涉及抗体技术领域。一种特异性结合真菌Eno1蛋白抗体或其片段，所述抗体或其片段对真菌Eno1蛋白具有特异性结合亲和力；所述抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)；其中，所述重链可变区(VH)包含以下的CDR组合：VH‑CDR1、VH‑CDR2和VH‑CDR3；所述轻链可变区(VL)包含以下的CDR组合：VL‑CDR1、VL‑CDR2和VL‑CDR3。本发明提供的抗体具有与致病真菌Eno1蛋白结合并抑制真菌侵袭宿主细胞的能力，可以单独或者与现有抗真菌化学药物联合用于治疗侵袭性真菌感染。