本发明涉及一种多拉菌素的纯化工艺。所述纯化工艺包括：(1)压滤：向多拉菌素发酵液中加入絮凝剂，压滤，得到菌渣；(2)萃取、浓缩：利用有机溶剂对菌渣进行萃取，得到萃取液A；将萃取液A浓缩得到膏状物，将膏状物降温至30℃以下；(3)浸膏萃取：向膏状物中加入有机溶剂，搅拌，得到萃取液B；(4)分层：向萃取液B中加水搅拌，静置，分层，将上层液浓缩，降温抽滤，得到粗品A；(5)重结晶：利用有机溶剂对粗品A进行重结晶，降温，抽滤，得到湿晶体；干燥，得到多拉菌素成品。本发明的优点在于通过各步骤的结合和相互作用，可得到高纯度、高收率的多拉菌素。该工艺简单易行，安全性更高，适用于工业化推广。