本发明涉及一种聚丙烯酰胺凝胶，由分离胶和浓缩胶组成，分离胶为6～15wt％聚丙烯酰胺、0.35～0.4M三羟甲基氨基甲烷、0.03～0.2wt％四乙基乙二胺、0.1～1wt％亚硫酸氢钠和0.08～0.15wt％过硫酸铵；浓缩胶为4～5wt％聚丙烯酰胺、0.1～0.15M三羟甲基氨基甲烷、0.08～0.4wt％四乙基乙二胺、0.05～0.5wt％亚硫酸氢钠和0.08～0.15wt％过硫酸铵。本发明的聚丙烯酰胺凝胶因多种成份协同作用，保证稳定的凝胶凝固速度又提升溶液的长期稳定性，凝胶电泳分离蛋白的效果良好，蛋白条带清晰，不添加挥发性有毒加速剂TEMED的设计保证实验人员不受挥发性有毒化合物的伤害。