本发明属于医药生物领域，具体涉及靶向卵巢癌细胞特异性高表达蛋白FSHR的CAR载体及其构建方法和应用。所述的CAR载体包括FSHR单链抗体，CAR的结构为CD8leader‑FSHR scfv‑CD8α‑CD28‑CD137‑CD3ζ。以病毒感染方式获得含有该治疗载体CAR‑T细胞(Chimeric Antigen Receptor T‑Cell)，通过表达CAR结构，可识别并靶向杀伤高表达肿瘤相关抗原FSHR的卵巢癌细胞。