本发明适用于生物医药领域，提供了疫苗佐剂及其制备方法和应用及猪繁殖与呼吸综合征疫苗，该疫苗佐剂为将双链核酸和二乙胺基乙基葡萄糖加入碱性缓冲液中得到的溶液；所述溶液中的双链核酸的浓度为0.25~5mg/mL，二乙胺基乙基葡萄糖的浓度为1~2.5g/mL。本发明的疫苗佐剂联合猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)病毒可以提高机体的细胞免疫，诱导干扰素，减少PRRSV野毒产生的免疫抑制，从而使机体快速产生细胞因子，较快的产生高含量的中和抗体，增强了疫苗的安全性和免疫效力。