本发明提供了一种叶酸受体结合配体‑药物偶联物，该偶联物由维生素受体结合部分(F)n、接头(L)和药物或其类似物或衍生物(D)组成，其中n为2~4的整数。维生素受体结合部分优选叶酸或蝶酸，接头(L)包含多价接头L1和至少含有一个可释放接头的L2，(F)n共价连接到多价接头L1上，药物或其类似物或衍生物(D)与L2的可释放接头共价连接，L1与L2共价连接。本发明提供的偶联物对叶酸受体阳性的肿瘤细胞亲和力极大的提高，并且具有显著的抗肿瘤活性，而副作用明显降低。