本发明公开了一种多穗柯叶有效部位的指纹图谱检测方法。涉及中药质量控制方法。指纹图谱检测方法包括以下步骤：对照品溶液的制备；供试品溶液的制备；色谱柱以十八烷基键合硅胶为填料；采用梯度洗脱，流动相为甲醇与0.1％甲酸组成的梯度洗脱液，柱温是25℃；紫外检测波长为285nm；时间为140min；高效液相色谱法测得指纹图谱。本方法可以有效地用于多穗柯叶的质量控制。