本发明提供一种美沙拉秦灌肠液有关物质测定方法，本发明公开了一种美沙拉秦灌肠液有关物质的分析方法。本方法采用高效液相色谱法，以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填料，采用紫外检测器，选用了适当的有机相、缓冲溶液和水为流动相，采用梯度洗脱，有效地解决了美沙拉秦与杂质及杂质之间的分离问题。本方法专属性强，重复性好，能保证美沙拉秦中工艺和降解杂的可控性。