本发明属于生物医药和基因工程技术领域，涉及一种生产牛肠源溶菌酶蛋白的新的DNA序列。更具体的本发明提供了一种产生具有牛肠源溶菌酶蛋白活性的多肽的方法, 将含有核苷酸序列如SEQ ID N0 : 3所示的DNA可操作地连于表达调控序列, 形成牛肠源溶菌酶蛋白表达载体；表达、分离出具有牛肠源溶菌酶活性的蛋白。使用该方法生产的牛肠源溶菌酶其溶菌酶活性较高，同时应用本发明的生产方法分离纯化步骤简单易行，为牛肠源溶菌酶蛋白的工业化生产提供了一个高效的生产工艺。针对目前市场上的溶菌酶蛋白大部分来源于从鸡蛋中提取的鸡源溶菌酶，本发明的重组牛肠源溶菌酶具有成本低、安全性高等优势。