本发明公开了一种骨髓来源的破骨细胞培养方法，属于细胞培养技术领域。该方法是将已提取的骨髓用分离液处理后获得单核细胞，清洗后将所得的单核细胞加完全培养基和巨噬细胞集落刺激因子(M‑CSF)，接种于96孔板中，于第二天加含有RANKL和M‑CSF培养基培养。所用完全培养基，是在MEM Alpha basic培养基中添加胎牛血清和双抗制成的。其特征在于培养时间缩短，培养成本降低，使骨髓分离得到的可以分化为破骨细胞的单核细胞(破骨细胞前体细胞)纯度更大，培养得到的破骨细胞有相当甚至更好的效果，且破骨细胞在酶活性和数目来看具有更宽的范围，为筛选药物提供了一个更为精细、快速、便捷的培养方法。