本发明涉及一种人血浆中沙格列汀和5‑羟基沙格列汀的LC‑MS/MS高通量检测方法；本方法是取待测血浆样品混入内标溶液，内标溶液为乙腈：水(50 : 50，v/v)配制成的同位素标记物13CD2‑沙格列汀和13CD2‑5‑羟基沙格列汀浓度分别为5.00和10.0ng/mL的混合溶液，加入CHAPS水溶液后涡流并加热，再加入乙腈后涡流并离心，取上清液，氮气吹干后，加入复溶液进行复溶，复溶液为乙腈：水：甲酸体积比为95 : 5 : 0.1的混合液，得到待测样品，进行LC‑MS/MS分析；本发明的优点在于：该方法满足了临床大批量样品分析的需求，与现有技术相比具有操作简单、提取时间短、适合高通量样品预处理的特点。