本发明属于医药技术领域，涉及制备杯[n]咔唑类衍生物及其作为T交叉DNA荧光分子探针的应用。本发明所述的杯[n]咔唑衍生物，其化学结构通式如下。所述的杯咔唑衍生物，(1)在生理条件下可与不同结构核酸的相互作用，特异性识别T交叉DNA，并使之稳定。(2)两者之间相互结合所展现出的荧光选择性，对T交叉DNA相关疾病的早期诊断和预防的应用价值。